聚丙烯酰胺樣品的準備和收集
保持樣品（生物液體）溫度為4℃。0.3ml甘油和2.7ml樣品在分離前混合5分鐘。然后把處理好的樣品加入到電泳緩沖液的上層。這些蛋白在此電泳緩沖液中不是帶負電（PI<10.0）就是帶負電（PI>10.0），因此在電場中不是從正極遷移到負極就是從負極遷移到正極。已分離的蛋白分子用特殊的生理洗脫液連續(xù)洗脫，并用分部收集器收集。整個分離系統(tǒng)必須在4℃冰箱中進行。
純化的，半純化的和未處理的樣品都可以用于QPNC。樣品分離純化中應該避免類似于蛋白質沉淀等過程以防止蛋白變性�；瘜W穩(wěn)定的金屬蛋白可以用非變性的凝膠滲透層析來進行進一步純化。
1.3.4 定量和鑒定
Fe， Cu， Zn， Ni， Mo， Pd， Co， Mn， Pt， Cr， Cd和其它金屬輔因子可以通過ICP-MS（Inductively coupled plasma mass spectroscopy，電感耦合等離子體質譜）來定性和定量。因為PAGE條帶的高純度和選擇性凝集，相關的結構可以用非變性條件下的NMR來分析。
1.3.5 應用
QPNC的應用對象為分子量6-200kDa的酸性、堿性和中性金屬蛋白。在測定血液或其它臨床樣品中獨立的金屬蛋白結構和功能關系方面具有重要應用，因為不正確的金屬陪伴蛋白的折疊。例如超氧化物歧化酶（SOD）的銅陪伴蛋白出現(xiàn)在這些基質中或許預示著神經(jīng)病變疾病如肌萎側索硬化病等。QPNC-PAGE，SEC，ICP-MS和NMR等技術的連用可以得到病人或潛在的病人液體基質中相關金屬蛋白的生理狀態(tài)的結構。這一技術可以提高蛋白錯折疊相關疾病的診斷和治療水平。www.mails.yyvswhl.cn
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